納米顆粒跟蹤分析儀是一種基于納米顆粒跟蹤分析(NTA)技術(shù)的物理性能測(cè)試儀器,通過(guò)追蹤納米顆粒的布朗運(yùn)動(dòng)和光散射特性,實(shí)現(xiàn)粒徑、濃度及Zeta電位等多參數(shù)測(cè)量。該儀器利用激光散射視頻顯微鏡和高靈敏度CMOS傳感器,捕捉納米顆粒在液體中的布朗運(yùn)動(dòng)軌跡。通過(guò)分析顆粒的擴(kuò)散系數(shù),結(jié)合斯托克斯-愛(ài)因斯坦方程,計(jì)算其流體力學(xué)直徑,精度可達(dá)4nm。同時(shí),支持熒光檢測(cè)功能,可識(shí)別熒光標(biāo)記顆粒,實(shí)現(xiàn)多參數(shù)同步分析。
一、高精度光學(xué)系統(tǒng):實(shí)現(xiàn)單顆粒可視化
光學(xué)系統(tǒng)是NTA的核心,需滿足“清晰觀察納米級(jí)顆粒”并“避免多重散射干擾”的需求,特點(diǎn)如下:
光源:窄光束、低相干性
通常采用半導(dǎo)體激光器(如488 nm、640 nm),輸出光束經(jīng)聚焦后形成極細(xì)的圓柱形激光束(直徑約50-100μm),僅照亮樣品池中的薄層區(qū)域(減少背景干擾和多重散射)。
低相干性光源可降低顆粒散射光的干涉效應(yīng),使單個(gè)顆粒呈現(xiàn)為清晰的“亮點(diǎn)”,便于識(shí)別和追蹤。
成像物鏡:高數(shù)值孔徑(NA)
配備高倍顯微物鏡(如40×、60×),且數(shù)值孔徑(NA)較高(通常0.8-1.2),以增強(qiáng)對(duì)納米顆粒散射光的收集能力,確保小至10 nm的顆粒仍能被清晰成像。
物鏡與激光束同軸或呈特定角度(如90°散射角),避免直射光干擾,僅接收顆粒的側(cè)向散射光。
二、樣品池:適配微量樣品,減少顆粒沉降與團(tuán)聚
樣品池設(shè)計(jì)需滿足“低體積需求”“減少顆粒運(yùn)動(dòng)干擾”和“便于清潔”的特點(diǎn):
微量樣品容量
樣品池體積通常為10-200μL,適用于珍貴或低濃度樣品(如生物納米顆粒、外泌體),且可通過(guò)注射器或移液槍快速更換。
低擾動(dòng)流場(chǎng)
池體多為石英或玻璃材質(zhì),內(nèi)壁光滑,減少顆粒吸附;部分設(shè)計(jì)包含攪拌裝置(如磁力攪拌子)或輕微流動(dòng)系統(tǒng),避免顆粒因重力沉降導(dǎo)致的分布不均,但需保證擾動(dòng)強(qiáng)度不影響顆粒的布朗運(yùn)動(dòng)(NTA的核心測(cè)量依據(jù))。
溫控功能(可選)
部分高d型號(hào)配備溫控模塊(如20-40℃),可維持樣品溫度穩(wěn)定,避免溫度變化導(dǎo)致的液體粘度改變(粘度影響顆粒布朗運(yùn)動(dòng)速度,進(jìn)而影響尺寸計(jì)算)。
三、成像與追蹤系統(tǒng):捕捉顆粒動(dòng)態(tài)軌跡
該系統(tǒng)負(fù)責(zé)將光學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)化為數(shù)字圖像,并實(shí)時(shí)追蹤單個(gè)顆粒的運(yùn)動(dòng),特點(diǎn)如下:
高速相機(jī):高幀率、低噪聲
采用電荷耦合器件(CCD)或互補(bǔ)金屬氧化物半導(dǎo)體(CMOS)相機(jī),幀率通常為25-100幀/秒,可捕捉納米顆粒因布朗運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的快速位移(顆粒越小,運(yùn)動(dòng)越劇烈,需更高幀率)。
低噪聲傳感器確保在弱散射光下(小顆粒信號(hào)弱)仍能區(qū)分顆粒與背景噪聲。
同步控制模塊
激光、相機(jī)與數(shù)據(jù)采集單元同步工作,確保每幀圖像的時(shí)間間隔精確(如10 ms/幀),為后續(xù)計(jì)算顆粒擴(kuò)散系數(shù)(進(jìn)而推導(dǎo)尺寸)提供準(zhǔn)確的時(shí)間基準(zhǔn)。
四、數(shù)據(jù)處理單元:從軌跡到顆粒特性的量化
硬件上通常為連接相機(jī)的計(jì)算機(jī),核心是專用NTA分析軟件,其功能體現(xiàn)結(jié)構(gòu)與算法的結(jié)合:
顆粒識(shí)別與軌跡追蹤
軟件通過(guò)圖像分析算法(如閾值分割、邊緣檢測(cè))識(shí)別單幀圖像中的顆粒亮點(diǎn),再通過(guò)多幀匹配(如基于距離和運(yùn)動(dòng)連續(xù)性)追蹤同一顆粒在不同時(shí)間點(diǎn)的位置,生成運(yùn)動(dòng)軌跡。
統(tǒng)計(jì)分析與結(jié)果輸出
對(duì)數(shù)百至數(shù)千個(gè)顆粒的尺寸進(jìn)行統(tǒng)計(jì),生成粒徑分布直方圖、濃度(顆粒數(shù)/體積)等結(jié)果,并可通過(guò)軟件校準(zhǔn)(如使用標(biāo)準(zhǔn)顆粒驗(yàn)證尺寸準(zhǔn)確性)。
五、整體結(jié)構(gòu)的集成性:兼顧操作性與穩(wěn)定性
光學(xué)模塊、樣品池和成像系統(tǒng)通常集成在一個(gè)緊湊的主機(jī)內(nèi),減少外界振動(dòng)和光線干擾;部分型號(hào)設(shè)計(jì)為開(kāi)放式樣品臺(tái),便于觀察和調(diào)整。
操作界面簡(jiǎn)潔,支持自動(dòng)化參數(shù)優(yōu)化(如曝光時(shí)間、增益),降低人為操作誤差,同時(shí)允許高級(jí)用戶手動(dòng)調(diào)整參數(shù)以適應(yīng)復(fù)雜樣品(如高濃度、多分散體系)。
