等溫滴定微量熱儀是如何工作的？

   等溫滴定量熱儀（Isothermal Titration Calorimetry, ITC）是一種研究分子間相互作用的非標(biāo)記技術(shù)（Label-Free Technique），它通過檢測(cè)分子間相互作用過程中由于價(jià)鍵形成或者打開而造成的放熱或者吸收現(xiàn)象來計(jì)算分子間相互作用的定性和定量信息，包括作用有無結(jié)合、結(jié)合強(qiáng)弱（親和力），結(jié)合比例（化學(xué)計(jì)量比），作用機(jī)制（ΔH, ΔS和ΔG等），酶促動(dòng)力學(xué)（Km, Ki, kcat）等等。

   等溫滴定量熱儀主要由隔熱夾套包裹著的樣品池、參比池、注射器和計(jì)算機(jī)組成，注射器同時(shí)具有攪拌作用，計(jì)算機(jī)控制溫度控制裝置和信息反饋系統(tǒng)。恒溫條件下當(dāng)?shù)味ㄟM(jìn)行前，首先反饋系統(tǒng)給樣品池一個(gè)連續(xù)的能量確定基線。滴定進(jìn)行時(shí)，注射器滴入反應(yīng)物與樣品池中被滴定物相互作用反應(yīng)，形成復(fù)合物。復(fù)合物的形成伴隨著能量的釋放或吸收，導(dǎo)致樣品池溫度的變化，參比池始終保持在實(shí)驗(yàn)溫度，反饋系統(tǒng)提供熱或降低熱量來補(bǔ)償樣品池的溫度變化，每注射一次后系統(tǒng)恢復(fù)至平衡狀態(tài)再進(jìn)行下一滴滴定。結(jié)果以峰的形式表示平衡溫度偏移所需要的能量，峰的面積相當(dāng)于反應(yīng)釋放或吸收的熱量。隨著池中反應(yīng)趨于飽和，熱量信號(hào)逐漸減弱知道只看到背景熱量。最后將熱量進(jìn)行積分并運(yùn)用合適的結(jié)合模型得到親和力、化學(xué)計(jì)量比、和反應(yīng)焓變等。

   MicroCal PEAQ-ITC 是一款高靈敏度、低容量的等溫滴定微量熱儀，可用于生物分子相互作用的無標(biāo)記溶液內(nèi)研究。 它可以在單次實(shí)驗(yàn)中直接測(cè)量所有結(jié)合參數(shù)，并且可使用低至 10µg 容量的樣品對(duì)無論是高親和力還是低親和力的結(jié)合劑進(jìn)行分析。 半自動(dòng)維護(hù)可減少操作人員的干預(yù)，系統(tǒng)可升級(jí)至全自動(dòng) MicroCal PEAQ-ITC Automated。