【知識庫】為什么GPC需要光散射？

凝膠滲透色譜（GPC），又稱尺寸排除色譜（SEC），是一種使用特殊的色譜柱、按照尺寸大小分離天然與合成高分子、生物高分子的色譜技術。

GPC 色譜的操作原理是利用分子的流體力學半徑（Rh）或流體力學體積（Vh）進行分離，而非利用分子量的差異。分離過程在GPC色譜柱中進行，其柱填充物通常是聚苯乙烯凝膠、玻璃粉或硅膠等多孔物質。由于分子大小的差異，較大的分子無法進入凝膠的空隙，能更快的從色譜柱中被洗脫。

凝膠滲透色譜過程始于單相色譜泵，它推動流動相持續流過系統管路。系統內置脫氣機則會去除管路以及溶劑中氣體，以提高信號穩定性，降低噪音。進樣方式可以是人工進樣或自動進樣。樣品溶液隨即被導入GPC色譜柱，開始尺寸分離過程。當樣品從色譜柱被洗脫后，它將被一個或多個檢測器進行檢測，其結果最終被電腦的數據處理系統進行分析。

GPC色譜的分析程度取決于系統檢測器的種類與數量。通過選定不同的檢測器，按照不同的校準方法可以計算出分子量（MW）、分子量分布（MWD）、特性粘度（IV）、分子密度、水力半徑（Rh）與回轉半徑（Rg）等參數。同時，也可能獲得諸如構造、聚集度、支化等大分子結構以及共聚物組成等額外信息。

根據檢測系統（檢測器的數量及類型）的不同，常見有以下兩種實驗方法：

1. 傳統校準法

2. 三檢測聯用法（包含了光散射檢測器）

其中，傳統檢測法運用濃度檢測器和已校準的GPC柱，能夠測量相對分子量和聚合度多分散性。而光散射檢測器和濃度檢測器聯用，能夠提供絕對分子量、分子尺寸大小、特性粘度以及分子構成、聚集與支化的信息。